تعیین کلون غالب انتروکوکوس فسیوم چند مقاومتی در نمونه های بالینی با روشهای الکتروفورز میدان پالسی (pfge) و تایپینگ سکانس چند ناحیه ای (mlst)

در سال های اخیر، انتروکوکوس فسیوم چند مقاومتی(mdr) به عنوان یک پاتوژن مهم بیمارستانی در نظر گرفته شده است. انتروکوکوس فسیوم برای مدت طولانی در خارج از بدن انسان و در محیط بیمارستان می تواند زنده بماند و آلودگی متقابل بین بیماران و محیط بیمارستان رخ دهد. مجموعه کلونال 17(cc17 ) زیر مجموعه ژنتیکی بزرگ انتروکوکوس فسیوم در بیمارستان ها در سراسر دنیا می باشد. تا به حال گزارشی از کلون های غالب انتروکوکوس فسیوم در بیمارستان های ایران وجود ندارد. این مطالعه بر بررسی ارتباط ژنتیکی و تعیین کلون های رایج سویه های انتروکوکوس فسیوم ایزوله شده از بیماران بستری در چهار بیمارستان اصلی آموزشی درتهران متمرکز شده است. 520 نمونه بالینی ( ادرار، زخم ، خون ، مایع پلور، آبسه ، خلط ، صفرا ، تراشه) از بیماران بستری و 85 نمونه محیطی (ملحفه، تخت، نوک کاتتر، چارت بیمار، ونتیلاتور ، دست پرسنل و پمپ سرنگ در بخش icu) از چهار بیمارستان اصلی آموزشی تهران در خلال شهریور 1390 تا خرداد 1391جمع آوری گردید. الگوهای مقاومت آنتی بیوتیکی و حداقل غلظت مهاری (mic) ونکومایسین، آمپی سیلین و جنتامیسین به روش های دیسک دیفیوژن و آگار دایلوشن ، حضور ژن های مقاومت به ونکومایسین و ژن ویرولانس esp به روش pcr بررسی شد، ارتباط ژنتیکی در 45 سویه چند مقاومتی انتروکوکوس فسیوم به روش الکتروفورز میدان پالسی (pfge) مورد بررسی قرار گرفت. از میان این 45 سویه، 21 سویه بر اساس تفاوت در نتایج pfge، تاریخ جداسازی، نوع نمونه، بیمارستان و بخش به منظور تعیین کلون غالب انتروکوکوس فسیوم در بیمارستان های مورد مطالعه انتخاب و سرانجام با استفاده از تکنیک تایپینگ سکانس چند ناحیه ای (mlst ) شناسایی شدند. در مجموع 162 ایزوله انتروکوک از نمونه های بالینی و 28 نمونه محیطی جمع آوری گردید. در نمونه های بالینی و محیطی به ترتیب ( 44%)59 و ( 41%)12 سویه انتروکوکوس فسیوم شناسایی گردید. بیش از (57 )96% و ( 5)40% از این ایزوله ها الگوی چند مقاومتی را نشان دادند که (32)54% و (3)25% آنها به ونکومایسین مقاوم بودند. تمامی سویه های مقاوم به ونکومایسین دارای ژن vana بودند. مقاومت همزمان به ونکومایسین، تیکوپلانین، آمپی سیلین، جنتامیسین، سیپروفلوکساسین، اریترومایسین و نیتروفورانتوئین در بیش از 50% سویه های انتروکوکوس فسیوم مشاهده گردید. ژن esp به ترتیب در (43)74%و (2)16% سویه های بالینی و محیطی انتروکوکوس فسیوم شناسایی شد. آنالیز نتایج pfge وmlst به ترتیب 17 پالسو تایپ و 15 سکانس تایپ را مشخص کرد. (18)86% سویه ها متعلق به cc17 بودند. دوازده st جدید برای اولین بار در این مطالعه گزارش گردید. تقریبا 50% stها مرتبط با st203 بودند. پالسوتایپ های c , d و f و سکانس تایپ های 203 و 740 در سویه های بالینی و محیطی شناسایی شدند. نتایج این مطالعه انتشار پلی کلونال سویه های انتروکوکوس فسیوم با الگوهای مقاومتی پرخطر با غالبیت cc17 را در بیمارستان های تهران نشان می دهد. حضور سویه های متعلق به cc17انتروکوکوس فسیوم در محیط بیمارستان نشان دهنده احتمال انتشار آنها بین بیماران و محیط بیمارستان های مورد مطالعه می باشد.